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实现最佳实践:库准备

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问题和答案

建议输入量为每池10ng。允许的范围是1-100 ng /池。

AmpliSeq用于从FFPE样品中提取的低质量DNA。对于低质量的样品或样品质量未知的样品，建议在扩增目标步骤中增加三个PCR循环。看到调整热循环程序表中放大DNA的目标部分的AmpliSeq为Illumina定制和社区面板参考指南．

操作时间< 1.5小时，不包括库量化、规范化和池化。总检测时间为5-7小时。

不，本分析中使用的适配器是专门为AmpliSeq工作流程设计的。适配器有专有的设计和修改。Nextera或TruSeq适配器与本分析不兼容。看到AmpliSeq为Illumina面板部分的Illumina适配器序列文档用于适配器序列。

Illumina库的AmpliSeq在池之前是手动规范化的。

看到稀释和规范图书馆部分的AmpliSeq为Illumina定制和社区面板参考指南．

看到稀释库至最终加载浓度部分的AmpliSeq为Illumina定制和社区面板参考指南．

提示和技巧

  • 底漆浓度可以在定制面板管标签上找到。
  • 为你的热循环器使用合适的板和兼容的磁铁。
  • 当使用MicroAmp Endura板时，在热循环期间，在密封板上放置一个压缩垫
  • 确保板被充分密封，以避免在旋涡步骤和边缘孔蒸发过程中交叉污染。
  • 看到技巧和技术部分的AmpliSeq为Illumina定制和社区面板参考指南．
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