最佳实践

• 密封一个盘子
• 办理图书证
• 图书证载入指引
• 图书证载入技术
• 处理样品
• 收集库
• 处理库分离管带

密封一个盘子

• 在执行以下步骤之前，一定要密封96孔板:
  • 离心机
  • 热循环
• 将胶封盖在印版上，用橡胶辊密封。
• 微密封“B”胶密封在-40°C至110°C有效，适用于裙边或半裙边PCR板。

办理图书证

• 在图书证校验或运行时，为避免损坏仪器，请勿将图书证指南放在图书证上。
• 使用图书卡锁扣释放器从图书卡阶段加载和删除图书卡。
  • 不要把借书证扣好。
  • 用过的图书卡中的油和试剂会从卡中溅出来，溅到仪器上。
• 将使用过的借书证从仪器上取下时，应保持其水平度，以免其内容溢出。

图书证载入指引

• 借书证在借书证台上时装车，以免溅出或干扰已装车的内容。
• NeoPrep控制软件指导您完成设置运行和加载库卡的步骤。使用本指南中的加载过程作为参考。
• 当样品板在热循环器上时，进行加载库卡准备和初始软件设置。
• 在图书证验证或运行期间，不要打开隔间门。
• 装油后更换手套。
• 将试剂板上的内容物转移到文库卡上相应孔上。
• 参考试剂板和库卡指南上相应的颜色和标签。
• 确保移液管在开始前已校准。未校准的移液器会导致试剂分配不当，导致运行失败。
• 使用附录中指定的移液器和吸管头TruSeq链mRNA文库预备NeoPrep参考指南．不支持其他移液器和针尖，可能导致试剂不能正确分配和运行失败。
• 使用多通道移液管加载试剂，样品和适配器。
• 为避免损坏仪器，请确保运行前将借书证指南从借书证上取下。

图书证载入技术

• 使用适当的借书证加载技术和指定的加载角度。
• 移液至第一站，以避免产生气泡。
• 插入与井垂直的吸管头。
• 在分配时，将吸管尖端插入井底。待试剂完全调配完毕后，再抬起针尖。
• 在图书证指南上的井标签和点状井轮廓下，将吸管尖点成一定角度分发。
• 移液管的装载角度取决于所分配的物品。角度在NeoPrep Control Software加载指南的每个步骤中指定，并在TruSeq链mRNA文库预备NeoPrep参考指南．
• 一个图标代表加载角度和体积是指定在NeoPrep控制软件加载指南。
• 如果液体不能从移液器尖端流出，请增加移液器的角度。

处理样品

• 始终跟踪每个样品的位置。
• 每个样品之间更换提示，避免交叉污染。
• 装载前不要离心样品。
• 在装入图书卡之前，搅拌时，触摸并保持吸管头在井的底部。使用相同的技巧将示例加载到借书证上。
• 在从样品板转移到借书证的过程中，移液管尖端可能会有一些空间。

收集库

• 当借书证处于借书证阶段时，卸载借书证。
• NeoPrep控制软件指导您完成卸载图书卡的步骤。使用TruSeq链mRNA文库预备NeoPrep参考指南作为参考。
• 不要使用20 μ l吸管。它和借书证不太合适。
• 垂直插入移液管顶端，并将其触碰收集井的底部。
• 用一只手按住图书卡，同时从藏书口取下提示，以防止图书卡移动。
• 图标表示所需的移液器角度，音量在NeoPrep Control Software卸载指南中指定。
• 检查每个移液管尖端，确保在NeoPrep控制软件指示的尖端有蓝色库滴。
• 如果在每个预期的移液管尖端都看不到蓝色的库滴，请执行以下操作:
  • 将萃取液转移到相应含RSB的板孔中。
  • 不要将液体倒回借书证内，这样会产生气隙，干扰借书证的提取。
  • 对于不含蓝色液滴的孔，使用单通道移液器重复转移1次。不要尝试转移超过2次。
• 在RSB中用力上下移动移液管，将蓝色库滴从移液管尖端移出。

处理库分离管带

• 标签管，以支持跟踪样品位置。
• 用平板或其他装置的孔将库分离管条竖直固定。
• 不要离心库分离管条。