需求和兼容性

NeoPrep系统将库标准化到10nM。

  • 将归一化库稀释到指定的变性前浓度(例如,NextSeq为4 nM)。
  • 变性并将库稀释到指定的中间浓度(如NextSeq的40 pM)。根据不同的应用,变性和稀释后的池化会增加库的复杂性,因为当每个库在更大的体积中分别变性时,最终混合物中存在的独特分子数量。
  • 在指定的负载浓度加载变性样品(例如,NextSeq的2-3 pM)

NeoPrep文库的TruSeq搁浅mRNA Library的准备结果如下:

仪器

插入大小

Predenature浓度(nM)

变性/稀释中间浓度(pM) 混合的变性样品pM负载

期望簇密度(mm2

MiSeq

200

10

50 10

1200

NextSeq

200

4

40 2 - 3

~ 200

HiSeq 2500高输出v3

200

2

20. 6 - 10

700 - 1000

HiSeq 2500高输出v4

200

2

20. 12 - 15

1250

HiSeq 2500快速运行v1

200

2

20. 6 - 10

600 - 1000