最佳实践

• 确保一致性
• 避免交叉污染
• 处理磁珠

确保一致性

• 为确保一致性accross样本，可以在可能的情况下使用多通道移液管。定期校准移液器。
• 为了避免在执行少于96个样品的实验时避免不必要的冻融循环，Illumina建议您第一次解冻后通常储存的较小的试剂等分试样。
• 确保中和缓冲液(NT)在室温下。目视检查NT，确保没有沉淀。如果有沉淀，旋涡直到所有的微粒重新悬浮。

避免交叉污染

• 始终使用样品之间的新鲜过滤器提示以及分配指数引物之间。
• 用多通道移液管混合样品，并在指示时离心平板。不要使板产生涡流。
• 仔细吸移液以避免溢出。
• 清洁移液器和更换手套在处理不同的适配器股票。
• 在操作前后彻底清洁工作表面。

处理磁珠

• 在使用之前，请允许珠子进入室温。
• 在使用之前，旋涡使珠子充分分散。液体的颜色应该是均匀的。
• 注意尽量减少珠子的损失，这会影响最终的产率。
• 改变每个样本的提示。
• 让混合样品在室温下孵育，按照协议规定的整个时间，以确保最大回收率。
• 当从反应板和洗涤步骤中吸出所清除的溶液时，重要的是将板保持在磁台上并不干扰分离的磁珠。缓慢吸气以防止珠子在井的侧面滑动并进入移液管尖端。
• 为防止洗脱后珠粒残留，洗脱液从珠粒中去除时，留下约2.5 μl上清。
• 总是准备新鲜的80%乙醇。乙醇容易从空气中吸收水分，因此，新鲜80%的乙醇应新鲜制备，以达到最佳效果。
• 一定要从井底除去所有的乙醇，因为它可能含有残留的污染物。
• 将反应板保持在磁场上，使其在室温下风干，以防止由于静电力引起的电位胎圈损失。允许完全蒸发残留的乙醇，因为乙醇的存在会影响随后的反应的性能。Illumina建议干燥时间至少15分钟，但可能需要更长的干燥时间。
• 用单通道或多通道吸管重新悬浮干燥的颗粒。
• 从井中去除和丢弃上清液时，使用单通道或多通道移液管，并注意不要打扰珠子。
• 为了在洗脱期间最大化DNA恢复，在将样品放入磁体上之前在室温下孵育2分钟的DNA /珠子混合物。