独特的分子标识符(UMIs)是一种分子条形码,在测序过程中提供了错误校正和提高了准确性。
这些分子条形码是用于在样本库中对每个分子进行唯一标记的短序列。UMIs用于广泛的测序应用,许多是围绕DNA和cDNA中的PCR重复。UMI重复数据删除在RNA-seq基因表达分析和其他定量测序方法中也很有用。
UMIs测序可以降低变异呼叫的假阳性率,提高变异检测的敏感性。由于起始材料中的每一个核酸都有独特的分子条形码标记,生物信息学软件能够以较高的准确率过滤重复reads和PCR错误,并报告独特的reads,在最终的数据分析之前将识别出的错误消除。
虽然这两种技术对于下游数据分析中的多路复用和解多路复用都是有用的,但关键的区别是UMI测序在PCR扩增之前用唯一的序列标记样品中的每个分子。
使用惟一的双索引(UDIs),每个示例索引都特定于一个给定的示例库。样本中的所有核酸都用相同的序列标签标记,结果库与其他库合并,并在一次运行中并行测序。
UMIs在给定样本库中的每个分子上都包含一个独特的条形码。通过在每个原始DNA片段上合并单独的条形码,原始样本中存在的变异等位基因(真正的变异)可以与文库制备、目标富集或测序过程中引入的错误区分开来。
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