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排序质量分数

质量分数排序简介

测序质量分数衡量一个碱基被错误调用的概率。通过合成排序(SBS)技术,读取中的每个碱基通过类似phred的算法分配一个质量分数1,2,类似于最初为Sanger测序实验开发的。

测序技术视频
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了解Illumina SBS的工作原理。

Q分数定义

给定基数的排序质量分数Q由以下等式定义:

Q=-10log10(e)

其中e是基本呼叫出错的估计概率。

  • 更高的Q分数表示错误概率较小。
  • 较低的Q分数可能导致大部分读取无法使用。它们还可能导致假阳性变异呼叫的增加,从而导致不准确的结论。

如下所示,质量分数为20表示错误率为1/100,相应的呼叫准确率为99%。

SBS技术综述

Illumina技术通过优化SBS化学实现大规模并行测序。

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排序质量分数与基本呼叫准确度的关系
质量分数 错误基本呼叫的概率 推断基本呼叫准确度
10(Q10) 十分之一 90%
20(Q20) 百分之一 99%
30(第30季度) 千分之一 99.9%
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Illumina测序质量分数

Illumina测序化学提供高精度,绝大多数碱基得分为Q30及以上。这一精度水平非常适合于一系列测序应用,包括临床研究。

yobet亚洲了解为什么PhiX可以用作Illumina NGS运行质量监控的运行控制。

阅读公告

关于质量分数的其他信息

有关排序质量分数的详细信息,请阅读以下技术说明:

工具书类
  1. Ewing B,Hillier L,Wendl MC,Green P.(1998):使用phred的自动定序器跟踪的基本调用。I.准确性评估。基因组研究8(3):175-185
  2. Ewing B,Green P.(1998):使用phred的自动定序器跟踪的基本调用。二,。错误概率。基因组研究8(3):186-194