CRISPR(定期聚集空间短回文重复)ゲノム編集は,プログラム可能なRNAがヌクレアーゼ(Cas9など)にゲノムの特定の位置を標的とさせる革新的手法です。1,2CRISPR-Cas9技術は迅速,シンプル,かつ精確に遺伝要素の変異,発現抑制,発現誘発,または置換を実現できるため,世界中の研究コミュニティにおいて広く取り入れられています。
克里斯普ゲノム編集と次世代シーケンサーがもたらす情報のパワーとの統合により、研究者によるゲノム編集実験全体での完全な制御が可能になり、改変する生物系をより深く理解できるようになります。
克里斯普ゲノム編集実験からは細胞集団が混じり合ったものが得られ、その中の小さなサブセットのみで目的の編集がされています。研究者は、どの細胞に目的の克里斯普ノックアウトや標的変異があるのかを判断する必要があります。編集を評価する現行の手法には、切断アッセイ、聚合酶链反应サンガー法、およびNGSなどがあります(表)。
门店は,全ての種類の改変にわたり高解像度で定性的情報も定量的情報も得ることができ,あらゆるスループットのニーズに対応でき,オフターゲット効果のモニタリングにも使用できる唯一の方法です。7门店を用いるターゲットシーケンスは,改変の標的領域に注目することでCRISPRによる編集を確認できるコスト効率の高いソリューションです。
ターゲットシーケンスの詳細はこちら脆/Cas9技術の実施を成功させるには、目的のターゲット以外の部位における意図しない改変であるオフターゲット効果を特定し、低減するストラテジーなどが必要となります。ゲノム編集実験では、核糖核酸の特異性を評価し、オフターゲット部位を予測する計算法が広く使用されています。
オンラインツールやウェブベースのアルゴリズムが公開されています(表)。ただし、予測アルゴリズムでは見逃されるおそれのあるオフターゲット部位を発見するには、NGSによる全ゲノムシーケンス(工作组)などの全ゲノム解析が必要です。8
WGSの詳細はこちらイルミナのゲノムポッドキャストエピソード32では、コロンビア大学生物化学与分子生物物理学助教である萨姆·斯特恩伯格博士が生物学および克里斯普とゲノム編集の影響についてお話します。
視聴はこちらイルミナのゲノムポッドキャストエピソード32では,コロンビア大学生物化学和分子生物物理学助教である山姆Sternberg博士が生物学およびCRISPRとゲノム編集の影響についてお話します。
听着克里斯普改変後に細胞集団をスクリーニングして、何千もの個々の細胞において同時に多数の遺伝子の遺伝子制御の影響を判定
トランスクリプトーム全体または遺伝子/遺伝子ファミリーの発現に対する変異の影響を評価
脱氧核糖核酸とタンパク質の結合に対する変異の影響を判定
メチル化状態およびクロマチンリモデリングに対する変異の下流影響を調査
Illumina,Inc.总裁兼首席执行官弗朗西斯·德苏扎(Francis yobet亚洲deSouza)在科罗拉多州的Aspen Ideas:Health大会上发言,向观众介绍基因组学对整个医疗保健的影响,以及更快地为更多人带来好处的紧迫性。
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