识别和比较来自复杂微生物群落或环境的微生物

基于ngs的ITS和16S rRNA基因测序是一种无需培养的方法,可以识别其他方法无法发现的细菌或真菌

16S和ITS rRNA测序

16S和内转录间隔(ITS)核糖体RNA (rRNA)测序是常用的扩增子测序方法,用于识别和比较给定样本中存在的细菌或真菌。基于下一代测序(NGS)的ITS和16S rRNA基因测序是比较复杂微生物群落或难以或不可能研究的环境中样品系统发育和分类的成熟方法。

原核16S rRNA基因长约1500 bp,其中9个可变区分布在保守区之间。16S rRNA基因的可变区经常被用于不同微生物群体中属或种的系统发育分类。1rRNA顺反子的ITS1区域是宏基因组样品中识别真菌物种的常用DNA标记。2

细菌

基于扩增子的下一代16S基因测序比基于毛细管测序或pcr的方法有一些优势。yobet亚洲了解它如何与本指南16S测序方法工作。

散弹枪宏基因组学方法指南
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16S和ITS核糖体RNA NGS方法的一个关键优点是,它们提供了一种具有成本效益的技术来识别传统方法无法发现的菌株。与毛细管测序或基于pcr的方法不同,下一代测序是一种无需培养的方法,可以分析样品中的整个微生物群落。

16S rRNA NGS允许微生物学家在细菌群体的宏基因组调查中达到属级的敏感性。ITS分析与NGS能够快速鉴定真菌,有助于促进我们对真菌群落的理解。此外,NGS提供了在测序运行中组合多个样本的能力。

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16S rRNA测序协议
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参考文献
  1. Weisburg WG, Barns SM, Pelletier DA, Lane DJ。16S核糖体DNA扩增用于系统发育研究。J Bacteriol。1991;173 (2):697 - 703
  2. Schoch CL, Seifert KA, Huhndorf S,等。核糖体内转录间隔区(ITS)作为真菌的通用DNA条形码标记。中国科学(d辑),2012,29 (6):641 - 646
  3. 人类微生物组项目联盟(2012)健康人类微生物组的结构、功能和多样性。486:207-14性质。
  4. McCafferty J, Mühlbauer M, Gharaibeh RZ, Arthur JC, Perez-Chanona E,等(2013)小鼠模型中微生物群落组装的随机变化和非创始人效应驱动笼效应。ISME学报doi: 10.1038/ismej.2013.106。