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冠状病毒测序

新冠病毒

2019冠状病毒疾病监测有助于对抗COVID-19

下一代测序(NGS)提供了鉴定新的冠状病毒菌株和其他病原体的有效,无偏见的方式,而无需先验知识1. 人们越来越关注SARS-CoV-2冠状病毒的快速传播、新变种,如B.1.1.7株[UK]和B1.351株(S。非洲),强调需要更多的测序来快速检测突变并防止新菌株的传播。新型冠状病毒用于2019冠状病毒疾病的早期鉴定2. NGS继续向公共卫生官员、疫苗和药物开发人员以及研究人员提供关键证据,使实验室能够:

  • 追踪病毒在全球的传播途径
  • 迅速检测突变以防止新的应变类型的传播
  • 确定可通过已建立的分子诊断分析避免检测的病毒突变
  • 确定可能影响疫苗效力的病毒突变
  • C2019冠状病毒疾病治疗的靶点筛选
  • 识别和表征呼吸道相容和抗微生物抗性等位基因
找到并控制SARS-COV-2和未来变体的传播更快
COVIDSeq检测SARS-CoV-2病毒突变,并提供关键信息以防止新菌株类型的传播。

比较冠状病毒检测方法

检测新的病毒 监测SARS-COV-2 检测和呼吸道病原体的监测
测试需求 霰弹枪偏心组合 扩增子
Illumina Covidseq测试(Ruo)
目标富集
速度和周转时间
可伸缩的和具有成本效益的
确定新的病原体
滑轨式传输
检测突变
识别合作感染和复杂疾病
检测耐药性

充分满足实验室检测需求

部分满足实验室测试需要

更多关于冠状病毒测序方法

霰弹枪偏心组合

对给定样本中的所有生物体进行全面测序,识别冠状病毒等新型病原体。这种国家地理信息系统方法有助于加快疫情调查并支持开发新的实验室检测方法。

靶向序列捕获测序

检测和表征冠状病毒,流感病毒和其他病原体呼吸道微生物,以及相关的耐药性等位基因。这些见解可帮助研究人员监测呼吸道感染和优化感染控制策略。这种方法捕获的通过杂交感兴趣的靶特异性探针的基因组区域。

扩增子测序

通过测序病毒基因组的特异性区域检测SARS-COV-2冠状病毒的存在。该方法涉及通过PCR扩增子的超深序分析利益的基因组区域。

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covid-19 ngs网络研讨会

对抗SARS-COV-2的基因组应用

两位领先的传染病研究人员讨论了基因组测序技术如何应对COVID-19大流行。

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临床宏基因组学分析SARS-COV-2

COVID-2019冠状病毒疾病强调了检测和监测SARS COV-2等新病原体的工具的需求。NGS导致了冠状病毒的初步检测,并加速了试验和疫苗的开发。

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用于SARS-COV-2检测和监测的NGS

yobet亚洲了解NGS对Covid-19大流行的广泛适用性,从初始检测和表征新的冠状病毒监测,监测和诊断检测。

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冠状病毒测序应用笔记

检测呼吸道病原体和耐药性

快速靶向富集测序广阔检测呼吸道病原体(包括SARS-COV-2,流感病毒和真菌)和相关的耐药性等位基因。

呼吸道病原体ID/AMR工作流程应用说明
呼吸病理学ID / AMR工作流程应用笔记的分析性能
发现和描述呼吸道病毒

快速靶向富集测序工作流程,用于高敏感的检测和表征冠状虫病毒,流感病毒和其他呼吸道病毒。

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使用Illumina MiniSeq系统快速检测呼吸道病毒

MiniSeQ快速试剂将测序运行时间减少至<5小时,允许快速检测冠状虫病毒和其他呼吸道病毒。

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Coronavirus软件工具
这些工具加快了冠状病毒测序数据分析,简化了样本跟踪,促进了宿主反应研究,并使科学家更容易为公共数据库作出贡献。

常见问题解答

在基本级别,诊断测试有助于临床医生管理患者,传染病监测需要管理人群。

诊断测试为个体患者提供重要的是/否答案,以便提供适当的管理。

监视帮助公共卫生官员跟踪流行病的路径,了解传输路线,执行联系跟踪,确定病毒演化的速度,并了解病毒是否正在改变可能影响诊断或治疗效果的方式。

NGS可以在事先不了解病原体的情况下对患者样本中的新病原体进行无偏检测。

传染病检测的一个关键挑战是,许多微生物,包括病毒,导致人类呼吸系统、消化系统和其他疾病,尚未被研究和鉴定,因此无法通过PCR等有针对性的方法进行了解或检测。PCR检测的发展需要对病原体基因组的了解。NGS在发现这些未知的新病原体方面起着关键作用;由此产生的基因组序列可用于开发常规检测,如PCR,以帮助临床医生管理患者。

NGS可以用来追踪病原体基因组的进化,以帮助公共卫生官员监督感染扩散,并确定在群体水平最佳的隔离计划。来自不同患者的测序的病毒随着时间的推移可以确定病毒进化的速度和地址的病毒是否在可能影响致病性以及诊断或治疗效果的方式发生变化。PCR是用来检测病原体基因组的特定区域的存在和整个快速发展的病原体的基因组将无法识别新的基因突变。此外,如果突变发生在引物或探针结合区PCR性能会受到影响。

流行病学家可以利用NGS研究全球患者样本中的病毒基因组突变。他们可以利用这些信息建立一个基因树(或图谱),以指示患者之间的传播路径。由于病原体的遗传相似性而形成的集群属于同一传播链内的患者。这些传播链使公共卫生官员能够快速确定病原体来源,追踪疫情路径,了解传播途径,并告知适当的遏制措施。

一种鸟枪宏基因组学工作流支持对新物种和已知物种进行排序。在涉及未知病原体的暴发期间,经常使用多种分子诊断试验;这可能会导致不必要的费用和鉴定病原体的延误。鸟枪宏基因组学可以作为一种单一的综合筛选分析,用于鉴定和表征病原体。这一研究工作流程有助于加快疫情调查,并支持为大规模筛查工作开发新的实验室测试。

一旦一种病原体如SARS-CoV-2被确定,一种目标富集工作流可以提供检测病毒所需要的高灵敏度,并提供有关其流行病学和演变信息。这些信息可以帮助研究人员优化感染控制策略,包括监测时,它是可以接受的逐步降级隔离机制,并继续在疫苗的开发正常活动和援助。

这些使用Illumina测序的互补工作流程可以与传统检测方法一起执行,并集成到全面的疫情应对模型中。

呼吸道病毒寡核苷酸面板包括7,800个探针序列序列伴呼吸道病毒,最近的流感菌株,SARS-COV-2和其他冠状病毒,以及人体探针,以充当阳性对照。这些探针是80-MEL寡核苷酸,非常靠近地间隔开,提供面板中所有病毒的全基因组覆盖。小组中病毒表:

  • 人冠状病毒229E
  • 人冠状病毒NL63
  • 人冠状病毒OC43
  • 人类冠状病毒HKU1
  • SARS-CoV-2
  • 人类腺病毒B1
  • 人类腺病毒C2
  • 人腺病毒E4
  • 人博卡病毒1型(灵长类博卡病毒1分离株st2)
  • 人博卡病毒2c株PK-5510
  • 人类博克苏达斯3.
  • 人类Parainfluenza病毒1
  • 人类Parainfluenza病毒2
  • 人类Parainfluenza病毒3
  • 人类Parainfluenza病毒4a
  • 人类偏肺病毒(CAN97-83)
  • 呼吸道合胞病毒(A型)
  • 人呼吸道合胞病毒9320(类型B)
  • 甲型流感病毒(A/Puerto Rico/8/1934(H1N1))
  • 甲型流感病毒(A/Korea/426/1968(H2N2))
  • 甲型流感病毒(A/New York/392/2004(H3N2))
  • 甲型流感病毒(A/goose/Guangdong/1/1996(H5N1))
  • 人体BOCAVIRUS 4 NI菌株HBOV4-NI-385
  • KI多瘤病毒斯德哥尔摩60
  • 吴多瘤毒
  • 人1型细小病毒PicoBank/HPeV1/a
  • 人类鉴于人6.
  • 人类鼻病毒A89.
  • 人鼻病毒C(024株)
  • 人鼻病毒B14
  • 人肠道病毒C104菌株:AK11
  • 人肠道病毒分离C109 NICA08-4327
  • 流感病毒(A / Zhejiang / Dtid-ZJu01 / 2013(H7N9))
  • 流感病毒(A / HONG KONG / 1073/99(H9N2))
  • 流感病毒(A / TEXAS / 50/2012(H3N2))
  • 流感病毒(A / MICHIGAN / 45/2015(H1N1))
  • 流感B病毒(B / LEE / 1940)
  • 流感B病毒(B / WISCONSIN / 01/2010)
  • 流感B病毒(B / Brisbane / 60/2008)
  • B型流感病毒(B/Colorado/06/2017)
  • 流感B病毒(B / Washington / 02/2019)
  • 人类控制基因

目标富集是一种通过杂交捕获感兴趣的基因组区域以靶向特定生物素化探针的重新测序方法。通过混合捕获方法实现的目标富集允许高灵敏度检测,因此不需要高读取深度。此外,靶标富集NGS工作流程允许靶标接近完整的序列数据,并为病毒进化或病毒监测打开了变异分析等应用程序。

或者,扩增子测序通过识别病原体基因组的特定区域来检测样本中目标病原体的存在。这种方法不能在快速进化的病原体基因组中识别新的突变(如病毒进化或病毒监测研究所需要的)。

靶标富集NGS工作流程允许获得靶标的几乎完整序列数据,并为冠状病毒进化或病毒监测研究提供了变异分析等应用。与其他靶向重测序方法(如扩增子测序)相比,通过混合捕获富集允许显著更大的探针板和更全面的靶区轮廓。此外,用于杂交捕获协议的寡聚物探针即使在高度致突变区域(这对于基于扩增子的分析(如qPCR)来说可能是困难的)内仍然有效,允许针对快速进化的病毒(如RNA病毒)。

一旦鉴定了SARS-COV-2冠状病毒等病原体,扩增子测序可以提供成本效益,快速,可扩展的病原体检测。当用作普通全基因组测序诊断方法时,它允许更广泛的目标覆盖,使其易于突变效应。对于研究,病毒全基因组测序可用于监测病毒突变并允许系统发育分析。

一旦鉴定了SARS-COV-2冠状病毒等病原体,就通过检测不同样品发现的完整基因组和基因组突变,提供高灵敏度检测与流行病学信息相结合。这些信息有助于定义传输的流行病学,并可以帮助公共卫生官员优化感染控制策略。

的Illumina公司呼吸道病毒寡核苷酸面板扩展检测到〜30个呼吸道病毒系列,并允许研究人员与面板中的其他病毒一起研究相同感染。

以扩增子为基础的NGS检测包括用于检测SARS-CoV-2病毒RNA的2019-nCoV引物。

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技术提示

新型冠状病毒的ILLA测序仪的去污

根据美国疾病控制与预防中心和世界卫生组织的建议,Illumina建议对疑似或已知接触过新型冠状病毒SARS-CoV-2 (2019-nCoV)的NGS仪器进行消毒。

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基于铵的清洁产品对测序运行性能的影响

在邻近测序运行设置附近,使用基于氨的清洁剂和消毒产品(在Covid-19大流行期间清洁实验室)可能导致测序运行性能度量降低。查看如何避免这些问题的提示。

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参考
  1. Burocha B.病毒性偏心神经评论及其在动物园和遗物病患中的未来观点。J BIOL农业医生。2017年;7(21):35-41。
  2. 中国地区肺炎患者的新型冠状病毒,20192020; 382(8): 727–733.