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测序质量分数

什么是测序质量评分?

测序质量分数测量底座被错误调用的概率。通过合成(SBS)技术进行排序,通过验证的算法分配了读取的每个基础1,2类似于最初为Sanger测序实验开发的。

测序技术视频
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查看Illumina SBS如何工作。

问分数定义

给定基础的测序质量得分Q,由以下等式定义:

Q = -10日志10(e)

其中e是基调用出错的估计概率。

  • 更高的Q分数表示误差概率较小。
  • 问的得分越低可能会导致读取的很大一部分不可用。它们还可能导致更多的假阳性变异调用,从而导致不准确的结论。

如下图所示,质量得分为20表示错误率为1 / 100,对应的呼叫准确率为99%。

SBS技术概述

Illumina技术可以通过优化的SBS化学来实现大规模平行的测序。

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排序质量评分与基础呼叫准确性的关系
质量分 基本呼叫错误的概率 推断基础呼叫准确性
10 (Q10) 1在10 90%
20 (Q20) 1在100 99%
30日(Q30) 在1000年1 99.9%

Illumina测序质量分数

Illumina测序化学提供高精度,具有绝大多数基础评分Q30及以上。这种精度级别是一系列测序应用的理想选择,包括临床研究。

yobet亚洲了解如何将PhiX用作Illumina NGS中运行质量监控的运行控制。

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看到的证据

关于质量分数的其他信息

要了解更多关于排序质量分数的深入信息,请阅读以下技术说明:

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参考文献
  1. Ewing B, Hillier L, Wendl MC, Green P.(1998):使用phred的自动音序器跟踪的基础调用。即精度评估。基因组研究》8 (3):175 - 185
  2. Ewing B, Green P.(1998):使用phred的自动音序器跟踪的基础调用。2错误概率。基因组研究》8 (3):186 - 194