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排序质量分数

对测序质量评分的介绍

测序质量分数衡量一个碱基被错误调用的概率。通过合成排序(SBS)技术,读取中的每个碱基通过类似phred的算法分配一个质量分数1,2,类似于最初为Sanger测序实验开发的。

测序技术视频
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了解Illumina SBS如何工作。

问分数定义

给定碱基的测序质量评分Q由下式定义:

Q=-10log10(e)

其中e是基本调用出错的估计概率。

  • 更高的Q分数表示较小的错误概率。
  • 问的得分越低可能导致很大一部分读取不可用。它们还可能导致假阳性变异呼叫的增加,导致不准确的结论。

如下所示,质量分数为20表示出错率为1 / 100,对应的呼叫准确率为99%。

SBS技术综述

Illumina技术通过优化SBS化学实现大规模并行测序。

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排序质量评分和基本呼叫准确性之间的关系
质量分数 基本呼叫错误的概率 推断基本呼叫准确度
10 (Q10) 十分之一 90%
20 (Q20) 百分之一 99%
30日(Q30) 在1000年1 99.9%
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Illumina测序质量分数

Illumina测序化学提供高精度,绝大多数碱基得分为Q30及以上。这一精度水平非常适合于一系列测序应用,包括临床研究。

yobet亚洲了解为什么PhiX可以用作Illumina NGS运行质量监控的运行控制。

阅读公告

关于质量分数的附加信息

有关测序质量评分的更多深入信息,请阅读以下技术注释:

参考文献
  1. Ewing B, Hillier L, Wendl MC, Green P.(1998):使用phred的自动音序器追踪的基础呼叫。即精度评估。基因组研究》8 (3):175 - 185
  2. Ewing B, Green P.(1998):使用phred的自动音序器追踪的基础呼叫。2错误概率。基因组研究》8 (3):186 - 194