与其他索引策略相比,独特的双索引允许您增加每次运行排序的样本数,并降低每个样本的成本。只需一个独特的双索引板,您就可以将96个样本汇集在一起。
除了唯一双索引外,双索引排序的另一种策略是使用组合双索引。在为多路复用准备库时,我们建议使用唯一的双索引。对于双索引库,排序运行包括两次额外的读取。额外的读取数据允许运行后分析软件以更高的准确性进行多路复用。
为了防止井板中的重复序列,唯一双重索引使用样本两端的唯一标识符。
一个独特的双索引板可以使用96个唯一的索引1 (i7)适配器和96个唯一的索引2 (i5)适配器将96个样本合并在一起。
使用组合双索引,序列在井板的行和列之间重复。
索引被限制为8个唯一的双对的索引组合,因此索引适配器共享一些序列。大多数库在i7或i5端共享序列。
一个独特的双索引板可将96个样本汇集在一起。相反,组合对偶索引仅限于索引8个唯一对偶对的组合。
应用程序 | 图书馆准备工具包 | 推荐的索引解决方案 |
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全基因组测序 | Illumina DNP制备 | IDT为Illumina UD指数 |
RNA测序 | Illumina单链mRNA制备 Illumina链总RNA Prep |
IDT为Illumina - RNA |
扩增子测序 | 照明面板的AmpliSeq | Illumina的AmpliSeq UD索引(用于≤ (24个样本) Illumina的AmpliSeq UD指数(对于>24个样本) |
靶向DNA富集 | Illumina DNA富集制备 | Illumina Nextera UD索引IDT |
我们将了解您的需求并提出建议。
唯一双索引在多路复用时可以有效地减少索引跳变引起的样本错配。当使用带有图形流池的仪器时,例如NovaSeq 6000系统,udi尤其有效。
独特的分子标识符已被证明可以降低假阳性变异调用率,并提高变异检测的灵敏度。它们可用于去除DNA和cDNA中的PCR重复,以及检测低频变异,如高度复合CNV检测。了解更多关于亚博官网人口yobet亚洲唯一的分子标识符。
一般来说,双索引是首选的方法。双指数排序确实需要额外的周期;但是,试剂盒的供应量足以执行额外的循环。在以下情况下,您可能仍希望执行单个索引:
本文件包含几个Illumina库制备试剂盒中使用的Illumina适配器的寡核苷酸序列。
yobet亚洲了解Illumina仪器上的单索引和双索引测序。
本文档提供了在汇集索引库时优化所有Illumina系统颜色平衡的建议。
查找用于Illumina唯一双索引的IDT的有用资源和支持信息。