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双指数排序

精确解复用

与其他索引策略相比,独特的双索引以最高的精度降低了每个样本的成本和序列库

双指数排序

理解双指数排序

与其他索引策略相比,独特的双索引允许您增加每次运行排序的样本数,并降低每个样本的成本。只需一个独特的双索引板,您就可以将96个样本汇集在一起。

双指标测序策略

除了唯一双索引外,双索引排序的另一种策略是使用组合双索引。在为多路复用准备库时,我们建议使用唯一的双索引。对于双索引库,排序运行包括两次额外的读取。额外的读取数据允许运行后分析软件以更高的准确性进行多路复用。

唯一对偶索引

为了防止井板中的重复序列,唯一双重索引使用样本两端的唯一标识符。

一个独特的双索引板可以使用96个唯一的索引1 (i7)适配器和96个唯一的索引2 (i5)适配器将96个样本合并在一起。

组合对偶指数

使用组合双索引,序列在井板的行和列之间重复。

索引被限制为8个唯一的双对的索引组合,因此索引适配器共享一些序列。大多数库在i7或i5端共享序列。

为什么要使用唯一的双索引?

独特的双重索引的好处包括:

  • 提高服务效率多路复用
  • 与组合双索引或单索引相比,允许在排序运行中包含更多索引,从而降低了每个样本的成本
  • 高纯度,在良好生产规范(GMP)条件下生产
  • 考虑色彩平衡的改进设计
  • 通过过滤跳转读取来减轻索引跳转

yobet亚洲亚博官网人口进一步了解独特的双索引如何帮助确保Illumina测序系统的高精度。

查看公告
UD和CD索引适配器的比较

唯一对偶和组合对偶索引适配器的比较

一个独特的双索引板可将96个样本汇集在一起。相反,组合对偶索引仅限于索引8个唯一对偶对的组合。

Illumina索引适配器

Nextera library prep使用工程转座体标记基因组DNA,这是一个将DNA片段化,然后在一个步骤中使用适配器序列标记DNA的过程。有限周期PCR步骤使用转接器扩增插入DNA。PCR步骤在DNA的两端添加索引适配器序列,从而在Illumina测序平台上对汇集的文库进行双索引测序。这些索引适配器不能与其他库PREP一起使用。

TruSeq library prep使用适配器嵌入索引实现高吞吐量处理和应用程序灵活性。通用的甲基化适配器设计在初始连接步骤中包含索引序列。相同的TruSeq试剂盒可用于在所有Illumina测序仪器上制备单读、双端和多路测序样品。RNA和DNA制备试剂盒都包括含有独特索引序列的适配器,这些序列在文库构建过程开始时连接到样本片段。这允许在下游分析期间汇集样本,然后单独识别。这些索引通常可以与其他库prep一起使用。

推荐用于关键应用的索引适配器和库准备工具包

应用程序 图书馆准备工具包 推荐的索引解决方案
全基因组测序 Illumina DNP制备 IDT为Illumina UD指数
RNA测序 Illumina单链mRNA制备
Illumina链总RNA Prep
IDT为Illumina - RNA
扩增子测序 照明面板的AmpliSeq Illumina的AmpliSeq UD索引(用于≤ (24个样本)
Illumina的AmpliSeq UD指数(对于>24个样本)
靶向DNA富集 Illumina DNA富集制备 Illumina Nextera UD索引IDT

经常一起购买

咨询专家,了解如何充分利用Illumina Library Prep

我们将了解您的需求并提出建议。

我应该使用唯一的双索引还是唯一的分子标识符?

唯一双索引在多路复用时可以有效地减少索引跳变引起的样本错配。当使用带有图形流池的仪器时,例如NovaSeq 6000系统,udi尤其有效。

独特的分子标识符已被证明可以降低假阳性变异调用率,并提高变异检测的灵敏度。它们可用于去除DNA和cDNA中的PCR重复,以及检测低频变异,如高度复合CNV检测。了解更多关于亚博官网人口yobet亚洲唯一的分子标识符。

单索引vs双索引

一般来说,双索引是首选的方法。双指数排序确实需要额外的周期;但是,试剂盒的供应量足以执行额外的循环。在以下情况下,您可能仍希望执行单个索引:

  • 仪器不支持双测序(HiSeq 1000/1500系统)
  • 读数需要再长几个碱基
  • 您的日程安排不允许运行第二个索引所需的额外1-2小时
NovaSeq 6000

NovaSeq 6000系统

NovaSeq 6000系统将最新的高性能成像技术与Illumina图案流动池技术相结合。更新的流动池设计减少了纳米孔之间的间距,显著增加了簇密度和数据输出。

查看系统

不断提高标准和优化工作流程的创新

双索引排序资源

Illumina适配器序列

本文件包含几个Illumina库制备试剂盒中使用的Illumina适配器的寡核苷酸序列。

索引顺序指导

yobet亚洲了解Illumina仪器上的单索引和双索引测序。

Illumina适配器池指南

本文档提供了在汇集索引库时优化所有Illumina系统颜色平衡的建议。

Illumina公司适配器支持

查找用于Illumina唯一双索引的IDT的有用资源和支持信息。