独特分子标识符(UMIs)是一种分子条形码,可在测序过程中提供纠错和提高准确性。
这些分子条形码是用于唯一标记样本库中每个分子的短序列。UMIs用于广泛的测序应用,许多都是DNA和cDNA中的PCR重复。UMI重复数据消除还可用于RNA-seq基因表达分析和其他定量测序方法。
使用UMIs测序可以降低假阳性变异呼叫的发生率,并提高变异检测的灵敏度。由于起始材料中的每个核酸都带有唯一的分子条形码标记,因此生物信息学软件可以高精度地过滤重复读数和PCR错误,并报告唯一读数,在最终数据分析之前消除已识别的错误。
虽然这两种技术在下游数据分析期间都可用于多路复用和解多路复用,但关键区别在于,在PCR扩增之前,UMI测序用唯一序列标记样本中的每个分子。
使用惟一的双索引(UDIs),每个示例索引都特定于给定的示例库。一个样本中的所有核酸都用相同的序列标签标记,结果库与其他库合并,并在一次运行中并行测序。
在给定的样本库中,ui将一个独特的条形码整合到每个分子上。通过在每个原始DNA片段上合并单独的条形码,原始样本中存在的变异等位基因(真正的变异)可以从文库制备、靶标富集或测序过程中引入的错误中区分出来。
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